N2B27培养基

mayiwaiwai

请问各位大侠，这个培养基有固定的配方吗，看文献用的都不太一样，是不是加了N2和B27的培养基都叫这个名字呢？

genedu

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- r, T: h$ r: Y5 N
: S/ A3 D' K) S, B* B; K! U( J) c, `建议您看看应启龙的那篇ground state文献

wbj1983

回复 mayiwaiwai 的帖子* G: ~' T( r: A* M8 q

9 q0 L# h* V5 q' F/ c基础培养基（DMEM/F12或neurobasal）+N2B27+LIF+2i+β-巯基乙醇+Glutamax+双抗，这个培养基我们实验室通常叫做N2B27培养基。这个培养基是适合用feeder free ES 细胞培养，不知道您是用来培养什么细胞的，不同的细胞培养基成分都有所不同的，希望我的建议对您的实验有所帮助！

hjd8886

我们实验室是：NeuroBasal+1%N2与F12+2%B27等体积混匀

mayiwaiwai

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( l& t# G+ A/ e% |0 H+ _/ D* H$ U% Y; }  c
谢谢你的回复，养的是R1细胞，也是想用feeder free 养的，用DMEM+FBS+LIF+2i+β-巯基乙醇+Glutamax+NEAA的组合来做，

mayiwaiwai

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/ M* Y6 q( c- P' x: k
( ~/ N+ U6 S2 @% B$ }" j2 @想问一下同学你的2i是怎么稀释的，所用的DMSO有什么要求么，比如说DMSO是不是需要过滤啊，可是加的这么少，新手，求指点

mayiwaiwai

回复 mayiwaiwai 的帖子5 w8 ]4 k5 _9 F9 [6 `
) h/ d% j0 Y# d" u, P
自己回复一下，CHIR99021稀释用DMSO处理，用冻存细胞的DMSO就可以，没有特别的处理，稀释后分装就可以啦

wbj1983

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+ o, y/ n2 w$ T4 e2 w, t0 J
3 c7 O/ B$ Y6 C3 M) n3 O0 ?" GDMSO: SIGMA D2650，不需要过滤，现配成stock，用时按工作浓度需要加到培养中就可以，希望对你有帮助！

xiaocell

我们还加了BSA和insulin

mg1551

好吧