细胞免疫荧光问题

shxwang

请教大家为什么分化5-6天的神经元也会被胶质细胞的marker GFAP给染上，有没有什么mraker可以将神经元和胶质细胞区分开？谢谢！

birdflubirdflu

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" [) ^. U+ ~3 O" d' Y$ D
$ j+ }* E9 ~3 X: l0 D) d请注意神经元的progenitors也是表达EGFP的 ，所以你可以使用S100b 染，或者使用definitive astrocyte markers。

dianying

回复 birdflubirdflu 的帖子0 [2 m: [) }) K3 h$ J
+ B1 @4 b: ]* {: J6 p  @
EGFP 和 GFAP 都是啥子关系？给补补课呗。

shxwang

回复 birdflubirdflu 的帖子0 Q4 }. R- m# v  e* p4 d

$ S  e7 X. s7 d0 [谢谢。但是S100b 好像会被分泌到胞外，这样还能染上胶质吗？我查阅了一些资料，但是很难找到definitive astrocyte markers，好像一般都是GFAP，你可以像我推荐一下么。十分感谢你~

birdflubirdflu

回复 dianying 的帖子7 M' J3 K% S( [1 r: u# g( W3 h2 ?

, h+ y: s1 p3 B打错了。。 我本来想打GFAP的，sorry.

lxm5668

把神经元和胶质细胞区分开,找到他们分别的特异性表达蛋白就行了。
8 r( C* Q/ z0 Z8 V) R/ s  u# B$ e神经元特异烯醇化酶（神经元）和胶质纤维酸性蛋白（胶质细胞）分别是他们的代表性蛋白。
; p% ^' w+ |- T% ]S100b 是标记雪旺细胞的。

如来的观音

NSC分化5-6天可能有部分分化为胶质细胞，区分神经元和胶质细胞可用神经元特异烯醇化酶或β-III-tubulin（神经元）和胶质纤维酸性蛋白（胶质细胞）

cortex

应该说用β-III-tubulin或者Map2标记神经元,用GFAP标记神经胶质细胞是可以分开的.你应该考虑你GFAP染色是否是假阳性.据我所知兔多克隆抗体GFAP很容易出现这种情况.

shxwang

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/ L$ I0 o/ r4 N% P3 q8 Q7 {) c( V0 ]! n, T* U- X( B2 J
谢谢~但是我的细胞只分化了5-6，还不是很成熟，不知道能不能染上。

shxwang

回复 如来的观音 的帖子" Y* O  L1 \/ m' Z2 \
' v+ C! p2 M; A- N
谢谢~我上次用了β-III-tubulin，但是发现神经元和胶质的形态已经有明显的差异，但是这两种细胞都能被染上β-III-tubulin，不知道为什么。。。