做脐带MSC时脐带粘丝状，什么原因？

huajie881026

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, M- |' o* P; Y2 m做了几次脐带原代MSC的分离，今天第一次碰到这种脐带：脐带拿回来3小时开始操作，脐带很粘，即使PBS反复冲洗三次还是很粘，有丝状物。, E: Z+ M- z# T8 r+ H7 C
以前几次脐带都是有点脆脆的，刀划下去很有感觉，这次的却很粘，各位大侠有碰到过这种问题吗？这位产妇有妊娠糖尿病、胎儿出生前因胎窘剖宫产，会是这方面原因吗？/ n* V# u6 N  f8 c* M
这样的脐带对分离出MSC有影响吗？9 G; r, x& l$ b6 K$ N

单个核细胞

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8 C; M' z0 ~" f$ ?. p) R% |回复 huajie881026 的帖子% e/ V* y" K/ O5 K' C+ O
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这种情况正常，不会对分离产生影响。可以过一下75%乙醇消毒30s，会有很大改善。
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. H" N( E6 `! Y  h& ~# E6 G1 y另，从照片看楼主的实验物料还需清理干净，注意无菌操作。

蓝O海

从图上看这跟脐带水肿很厉害，这就是脐带粘的主要原因，但是对分离后培养没有太大的影响，估计原代细胞会碎片多一些。多换几次也就行了。
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蓝O海

的确你的实验环境有很大的污染可能性。注意无菌操作啊。

Roden

脐带水肿，细胞爬出受阻小，反而容易成功。

huajie881026

单个核细胞 发表于 2012-8-15 09:22
4 z" D0 D) n, P; l9 X5 H回复 huajie881026 的帖子
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, K, R% T3 Q8 |7 u' D$ h这种情况正常，不会对分离产生影响。可以过一下75%乙醇消毒30s，会有很大改善 ...

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谢谢提醒，我们的原代超净台的确比较脏，以后会更加注意！

透明之蓝

回复 huajie881026 的帖子, F+ ]& z! b# j3 u$ D% R/ V$ j# m
) d. r4 L8 t" X6 m5 R6 {6 U
呵呵，你要是用过酶消化的方法就知道了，脐带里面很多多糖成分，所以会是这个样子！

huajie881026

回复 透明之蓝 的帖子$ Z9 E1 q$ H* E5 O/ ^
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消化法我的确做过，也的确很粘。不过不用消化法这么粘的还是第一次见
9 ~- q- [9 b/ u9 K7 k5 s6 o, Q酶消化法我做了一次没成功，所以没再尝试，你用酶消化法细胞量多吗？

PENGMINLBX

脐带粘  很正常的  对分离没什么影响    如果脐带不肿   可能还会比较好      但是你的操作环境很有问题

透明之蓝

回复 huajie881026 的帖子4 W# E' l$ V- m

5 D% u0 P/ R; ~* ~  B# n& h* |呵呵，酶消化法，还得加上透明质酸酶，这样就不粘稠了~~2 D; ^* w9 l2 n
你要是着急获取细胞，就酶消化，速度快；要是不着急，就可以用组织块贴壁的方法，一块组织块可以重复利用，收获的细胞更多！