荧光二抗稀释比例问题

开心果王

请教各位战友，做免疫荧光时用的荧光二抗（invetrogen公司）的稀释比例一般是多少啊，刚做过一次用的是1:500稀释的，效果还行。以前还1:200稀释过，感觉挺浪费的。不知道大家一般用的什么比例稀释二抗的！

ditiger

二抗一般稀释比例很大的吧，我们都是1:5000~~

wang3033

一般是1:1000 or 1:2000，甚至更高1:5000.

hcluo

+ f  x9 m7 ]8 G4 z/ a4 y* p
1 I0 |/ P9 K" |6 P- L* ]' {关键看你购买的二抗的原始浓度，保证二抗终浓度：0.5~5ug/ml。当然二抗的牌子也非常的重要。

南宫燚岚

1:400

不倒翁

免疫荧光 1:400

flyingatom

一般来说几家大公司如Invitrogen，Jackson等国外公司的产品可以稀释到1：1000，还是看你做出来的结果，背景，特异性等。大多数情况都得自己调整个一两次。
6 U: o' b. t% g1 L, R免疫荧光二抗没有试过1：5000。
+ L' q. N# K: K2 O$ ]0 j我用过的国内的产品大概1：200
- C' |1 L  v& ^& S4 g6 E8 Y% W" v6 osanta cruz的一般1：200

rain2402

4 Z) a" W3 C( Y4 m( K  k& H5 g* X* R' j( u4 W  l. q: |& }6 v' z+ l" H
二抗的比例都挺大的。很少有人加到超过1:1000的。我最大用过1:2000.一般都是1:2000-1:5000。太多了是浪费，而且可能会出现非特异性结合
9 z0 ]4 r" k. S: b! F4 A4 A

jkfly

1:200到1:2000我都做过，你可以浓度从小到大试一试，一次预实验确定浓度。