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[请教] 求助:BD matrigel 用法 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-7-28 18:28 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请教达人,我想用BD matrigel 及mTesR培养人iPS(六孔板),请问matrigel怎么用?需要稀释吗?怎么铺班子?谢谢!
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沙发
发表于 2011-7-28 22:54 |只看该作者
wicell上是根Matrigel的浓度来铺板的,我做分化用这个,用的是1:20细胞贴壁非常好
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藤椅
发表于 2011-7-28 23:26 |只看该作者
我是用1:30稀释后包被板子1h,吸掉就可以用了,如果想省点的话,可以再将其收集起来在加入另一个新的板子里,4度过夜处理!用tesr养的话应该没问题的
7 K2 F$ g  H6 o8 ?3 w/ Q  e' p
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发表于 2011-7-29 08:02 |只看该作者
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本帖最后由 grape 于 2011-7-29 08:08 编辑
9 M  ]0 B: G3 |. F, \) U1 y" ~2 }- p
! E; y3 V) K4 |% X回复 liufutang 的帖子6 y( q8 Q$ D! |
' [* p; [8 O, C0 N2 Z* y  z
BD Matrigel基质胶说明/ Z8 q9 Y8 \, x  O+ A/ X
* o. s3 f) z# p& |
BD Matrigel是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出基底膜基质,其主要成分有层粘连蛋白、Ⅳ型胶原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白,还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。在室温条件下,Matrigel聚合形成具有生物学活性的三维基质,模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能,有利于体外细胞的培养和分化,可用于对细胞形态、生化功能、迁移、侵染和基因表达等的研究。9 @% O8 f. D! u. y
BD Matrigel基底膜/基质胶形成的三维培养基质,可促进上皮细胞、肝细胞、Sertoli细胞、黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化。同时,Matrigel还能影响乳腺上皮细胞的蛋白表达,支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化。
8 N/ v- e4 Y( d  O不同配方的BD Matrigel可以满足不同的实验要求。低生长因子(GFR)的Matrigel基底膜基质适用于对基质成分要求严格的实验,如细胞信号通路和细胞因子的研究等。不含酚红的Matrigel适用于荧光检测或显色反应等分析。高浓度的Matrigel适用于研究血管生成、肿瘤细胞迁移和体内肿瘤模型的建立等。
$ L. w- {/ z  W& J; P5 V# q( g
3 y1 k$ `1 a# i" u- b, B 未命名.JPG : E2 p+ y4 ~. c) f

+ h( b9 @+ K' b来源:EHS小鼠肿瘤' E: y* S0 g# g) G1 D  X( g
使用指南:培养细胞时,Matrigel可无需稀释直接包被,包被厚度可为0.5 mm(薄层)或1.0 mm(厚层)。Matrigel也可以在无血清培养基中稀释后用于包被培养器皿表面,根据细胞类型和应用目的确定相应Matrigel浓度。
/ L7 P/ ^4 }* t) V' b) u8 W- l保存条件和效期:-20℃下冷冻保存,避免多次冻融。保质期详见产品说明。! k- q8 r6 ~! v* ^" F2 Q  Y
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runsong + 2 + 5 学习了

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报纸
发表于 2011-7-29 09:00 |只看该作者
谢谢各位的回答!今天我就试验一下。

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地板
发表于 2011-7-29 09:01 |只看该作者
谢谢各位的回答!今天我就试验一下。

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发表于 2012-2-4 01:35 |只看该作者
回复 grape 的帖子
7 K% t: j4 m* _5 u. Q, a8 z1 d6 C0 c! r( @1 P
您好,我现在也很要用matrigel做实验了,我是根据WI-CELL的protocol做实验,但是我现在找不到BD MATRIGEL的浓度在哪里,可以告诉下吗?还有就是如果是0.5mm厚度的话,那么6孔板的一个孔一般要加多少呢?
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发表于 2012-2-4 01:36 |只看该作者
回复 开心果王 的帖子
0 e1 ^) w4 q. S, w- C+ X. D$ B! \, H
$ l0 j$ l2 J. l8 a3 o6 V5 B不用看浓度吗,1:30是指与原液1:30稀释吗,那原液分装的时候直接稀释,还是使用前再稀释呢?
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发表于 2012-2-4 01:38 |只看该作者
回复 ly200101042 的帖子
+ {, |9 Z8 m' u& _3 F8 v, p9 `( T9 z/ c+ b  y# C& [" [
这个浓度在哪里可以知道呢,我的matrigel 货号是356230, lot:27690

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发表于 2012-2-4 01:42 |只看该作者
回复 ly200101042 的帖子# f/ b" @% Z$ K% r- U& y+ i

8 D' n6 C( M4 z浓度是说明书上的 protein concentration吗?
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