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求助:鼠胚胎干细胞容易分化是怎么回事   [复制链接]

wqcyqy0811

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楼主
发表于 2011-6-1 09:54 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请大家帮忙分析一下：鼠胚胎干细胞生长第二天长的还可以，但到第三天就有许多死细胞飘起来，细胞状态也不好，轮廓不清楚，感觉是分化了？可能是什么原因？我的培养基是15% Hyclone 胎牛血清，1%P/S，1%NEAA，1%L-G，1‰β巯基乙醇，高糖DMEM培养基，10ng/ml LIF.
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王乾

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沙发
发表于 2011-6-1 10:59 |只看该作者
不知道你的MEF怎么样，MEF对ES的状态影响是非常大的
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xiaoyurly

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藤椅
发表于 2011-6-1 11:06 |只看该作者
血清对ES的分化也有一定刺激作用，我们用12% FBS的培养基，不知你们以前培养的怎么样？
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wqcyqy0811

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板凳
发表于 2011-6-1 12:08 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
我以前养的可以，MEF细胞密度能达到90%。不知道为什么
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dilal

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报纸
发表于 2011-6-1 12:47 |只看该作者
问一下你用的hyclone血清是什么货号，如果不是ES专用的，不同批次的血清对mESC的增殖和分化影响不同。我们最近用gibco的血清也出现了ESC状态不好的现象，考虑跟血清批次有关，打算重新换血清。
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genedu

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地板
发表于 2011-6-1 12:52 |只看该作者
不是培养体系的问题
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干细胞狂想

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7楼
发表于 2011-6-1 13:34 |只看该作者
换成10%FBS，低糖DMEM。
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干细胞狂想

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金话筒 优秀会员

8楼
发表于 2011-6-1 13:35 |只看该作者
还有，大家有时提的这个问题，我发现文献看得有点少啊，很多高分文献都标注的很清楚，大家可以去搜来参考。
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llecstem

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9楼
发表于 2011-8-14 12:47 |只看该作者
我们培养ES用的gibco的knock-out SR，是一种血清的替代物
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starlight

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10楼
发表于 2011-8-15 10:27 |只看该作者
干细胞状态，饲养层状态是最主要的，
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