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国产胰酶我没用过,其作用原理跟你分享一下如下:细胞外含有多种胞外蛋白,如胶原蛋白;另外细胞与细胞之间也有很多信号通道等等连接的通路,主要成分是糖蛋白,使细胞间或细胞与培养瓶内壁粘连起来。用胰蛋白酶分解这些蛋白质后就可以使它们分开了!
8 }2 e7 P0 \( x$ N1 Y胰蛋白酶能够催化蛋白质的特定肽键水解,这个催化过程是不需要能量的,不会使酶失去活力,也不会改变形状和使自身水解。
c! v- v- B; [: N底物与酶的活性中心的结合是可逆的,这种结合使得蛋白质特定肽键因弯曲变形而被活化,更易于受到水分子的攻击,分别形成氨基和羧基而断裂,得到小分子多肽或氨基酸。
1 }6 E! W' @7 p+ t4 K* C/ s不同的蛋白酶可以作用在不同氨基酸相连组成的肽键,因此胰蛋白酶并不能作用在所有的肽键。 : m, ]$ r [+ b& \; v2 ^0 A
血清终止的原理其实是竞争抑制。就是用过量的牛血清中含有的蛋白来和胰酶结合。不给胰酶消化细胞蛋白的机会,0 y9 N U: `/ L+ R Q
所以我认为一般只要血清存在量有竞争优势情况下,胰酶的毒性应该可以忽略,具体应该也会对细胞状态有一点影响吧!
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