关于间充质干细胞表面的的黑点的问题

gsg040222

最近培养的干细胞在显微镜下观察，发现细胞表面粘附有将近20个黑点，并且这个黑点只在细胞表面，培养液中没有发现，在高倍镜下观察，黑点是不动的，还有就是细胞的伪足比我之前培养的细胞长将近⅓，还有就是观察细胞时，每个培养瓶中都有几个细胞团，这些细胞团是细胞核聚集在一起，甚至在低倍镜下观察都是亮亮的一团，伪足更长，其他细胞长得也比较稀疏，细胞扩增也比较慢，观察到这个问题是在原代传代后就有，也不扩增，但是传代后，过一天黑点的数量又成这么多，不增不减。用的培养瓶，不透气的瓶盖，传代终止用FBS，求原因啊，麻烦大家了。

rzghc

检查下支原体污染

zuishui

可能是分化了吧~你测过表型么？

淘知路遥

应该是用的胎牛血清，导致细胞内杂质太多，有镜下观察过干细胞把黑色物质一点一点聚集往外吐，这样细胞容易老化

fenglinzhu

回复 gsg040222 的帖子: q4 P0 k6 }7 `9 t* ]# k

& n( u. F; k; @5 T9 K这应该是细胞质基质吧，有可能是细胞老化了，伪足长，生长缓慢，我觉得可能是有分化现象吧。不知道你用的是什么培养基，血清浓度是多少？胰酶浓度，及消化时间呢？

gsg040222

回复 rzghc 的帖子7 X  `2 \( |. k

0 E0 N  w- R( e- h5 c) x3 D. e做不了啊

gsg040222

回复 zuishui 的帖子
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没有测过

gsg040222

回复 淘知路遥 的帖子- ~6 z( @! F" k- B- x  f
3 P/ R0 Z$ p7 G. U, b) Q9 _- Z! I
恩 好的，我再看看吧，麻烦您了

gsg040222

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4 i" O7 ]5 [: z/ K8 k" C6 m& |5 K2 r5 _0 J- B2 f2 S. G! X0 w
用的是无血清培养基，消化胰酶浓度0.025，也觉得细胞形态有些不正常

fenglinzhu

回复 gsg040222 的帖子7 w; O: U9 ]; D0 F5 o
% \- S) ~5 d( X/ I: P, y
无血清培养基的话是需要驯化的，不然的话细胞状态会很差