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楼主: zerollx
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慢病毒转染的原理及过程(个人理解,求解惑)   [复制链接]

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发表于 2012-10-12 20:44 |只看该作者
我们也用的293T,其他种类的细胞我也用过,不好,建议不要用,还有,你的思路很清晰,过程正确
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发表于 2014-1-11 20:09 |只看该作者
回复 shihuijunm 的帖子
3 C$ Z3 H0 \5 C" W- }6 B0 ?& i6 m5 s! t5 V) ^" g+ m$ Q/ l
The 293FT Cell Line, a derivative of the 293F Cell Line, stably and constitutively expresses the SV40 large T antigen from pCMVSPORT6TAg.neo and must be maintained in medium containing
+ y% j9 F  [; V* oGeneticin. So it's different from the 293 T cell line. * I8 e* U$ W* Z
Best regards!
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发表于 2014-1-11 20:16 |只看该作者
回复 greenjing 的帖子
! o" D5 z7 y4 W; N/ J9 ~
1 H" ]' E1 w! t1 u/ H' YThere are so many factors  influncing your transduction efficiency:1. MOI too low; 2. Too much antibiotic used for  selection; 3. Cells harvested too soon after  transduction; 4. Gene of interest is toxic to cells; 5. Non-dividing cell type used etc.
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发表于 2014-5-14 19:57 |只看该作者
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回复 zerollx 的帖子' {- {  t0 z+ Q9 E1 D

* M( Y: k- [/ e: E' s好像看有的说F的意思就是fast,生长速度比293T快,它们两个都是整合了SV40大T抗原。具体的也不是很清楚。
; M& B) |, D7 LThe 293FT Cell Line is derived from the 293F Cell Line and stably8 ]/ ]  ?- K- s% c: v" M2 f
expresses the SV40 large T antigen from the pCMVSPORT6TAg.neo plasmid./ B( O8 `; E: u0 {- M; Q- F: r
Expression of the SV40 large T antigen is controlled by the human cytomegalovirus) x1 W; ]* E9 v! M, z6 h$ u2 L# K4 s
(CMV) promoter and is high-level and constitutive. Studies have demonstrated maximal virus production in human 293 cells expressing SV40 large T antigen (Naldini et al., 1996), making the 293FT Cell Line a particularly suitable host for generating lentiviral constructs using the ViraPower Lentiviral Expression System available from Invitrogen.% i8 C' e* p# D7 Z. M
The 293 Cell Line is a permanent line established from primary embryonal human& ^$ K( J$ Q% X) N, t; H
kidney transformed with sheared human adenovirus type 5 DNA (Graham et al.,# v/ m8 O6 |9 b7 s- d  {# [
1977; Harrison et al., 1977). The E1A adenovirus gene is expressed in these cells
( v& M2 v; P4 i6 w. tand participates in transactivation of some viral promoters, allowing these cells to
9 Q/ _% P8 B: l2 U* J$ Q# }produce very high levels of protein.
$ }4 I  R2 Z# z$ z/ Q3 qThe 293-F Cell Line available from Invitrogen (Catalog no. 11625) is a fastgrowing
- F# |! ^; |2 j! P6 `variant of the 293 cell line, and was originally obtained from Robert Horlick at Pharmacopeia.
! c' G! c3 y% X这个以供参考!
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发表于 2014-6-16 12:46 |只看该作者
不错。
- d/ K" {/ W, z5 s& H: {) A% P& Q' W2 o! q

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发表于 2014-8-14 13:57 |只看该作者
如果不包装病毒,直接用脂质体2000转染目的细胞,比如MEF,结果会怎样呢?目的基本是不是也能转染到MEF中去?
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发表于 2014-8-15 08:29 |只看该作者
回复 小兔子lp 的帖子) T! w9 v! I: P
$ Y& O. ]8 j' q
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发表于 2017-5-31 12:35 |只看该作者
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发表于 2017-8-6 19:21 |只看该作者
实用,多谢
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