一个月的神经干细胞培养，请大家提出宝贵的意见（附图）

荤荤

回复 11# qyguoguo
9 `* D# H. f3 M; ~% u3 G% [- C谢谢qyguoguo，打算这个星期买一只孕鼠试试，之前只做过新生鼠，不知道取胎鼠的细胞时是否有什么需要注意的地方？能分享你的操作步骤吗？或者你那有什么视频或图片可以让我学习学习的

荤荤

回复 13# huangfei2010 ; L2 G! [6 p6 g4 Y7 t

4 t7 N, q2 R' ^' \, B+ O1 Q9 F3 ?  Z* Q7 p: J0 y
    谢谢huangfei2010，我细胞在培养的过程常出现“聚集现象”，就是在培养瓶的某个视野会发现神经球特别的多，大球接小球的，像手牵手的样子，其他的视野神经球会少很多,不知道你们是否会遇到这种现象。对于此种现象又该如何处理呢？有什么方法能使密度大的地方的神经球分开吗？不然它们都粘附到一块是不是就容易活力下降，甚至死了呢。我昨天就是把瓶子晃晃，尽量使它们分散开了，不晓得这么做可不可以，会不会影响它后期的聚球？

荤荤

回复 14# ouyangjuan
9 {: Y' S6 `  y7 k" {" I! l" z- r6 X9 {% j6 ~9 F& X; x

9 L$ {) _" e+ b" X2 J. r    谢谢 有时间我会好好看到

huangfei2010

回复 16# 荤荤 5 ]$ [5 N- n$ k) A( ?1 t
5 T% a: D2 r" L2 O0 g
3 \8 ^+ H/ g! v; [" T
      谢谢你的交流，我说的问题，我也遇到过，我觉得可能是神经球分泌一些细胞因子，相互吸引吧，还有我还看到一些神经球相互融合，不知道你有没有观察过，现在不都说神经球的形成不是单克隆形成的，是嵌合体，我养的神经干细胞数量随着时间的延长，在第二代的时候数量最多，随后就一直下降，也不知道人家文献那个生长曲线怎么做出来

huangfei2010

回复 15# 荤荤
2 t( O) n. G/ E1 ~, s) n, F6 z" K' z& H. W' T6 j% [6 G8 @* q* o1 b) n

9 N' Q- Y  F9 J( k* \) j    http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2532938/?tool=pubmed8 \6 }( ?$ a0 _# [! r# o/ I
你可以打开这个网址看看，上面有个视频，希望对你有帮助

SVZ

回复 16# 荤荤
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你说的这种情况我也遇到过，实验室的前辈告诉我可能是消化或机械吹打过度了，部分细胞破碎DNA释放出来，使细胞粘性增加。前辈说用点DNA酶处理一下就ok了。

liqinzhan

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7 e8 a) J! `( |: f2 _$ r8 {5 G8 S' v- F9 Z# {; o
用1mol/L NaoH调节PH值，置4度冰箱保存，可以继续使用的，平时使用时时间不能太长，防止酸碱度变化

hello-jun

我觉得你这个挺好的啊  和我们培养的差不多 像你这么大的时候 我们早就开始传代了

hello-jun

我们培养的时候都是在培养皿里面培养的 我不知道为什么你的在瓶里就很容易贴壁 我的要让细胞贴壁的话 还需要加pdl 加 LN处理以后才会贴 有时候处理不好的话 还比贴  你那个真好 自己就贴上去了

jennyshy

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& o1 f9 t4 Y9 Y% \; U" g/ i& H. ~7 i" Q, Y5 U- X  E! X- ~
我养过胎鼠和乳鼠的神经干
+ B7 ^% l% a9 D+ u, ]+ W个人认为胎鼠优于乳鼠
" `& u( G+ {: N& ~3 j# X& M- C. L6 z* r( J# g; R
从你初期的图片看有几个问题你需要改进一下1. 原代4d神经球过大，会导致后面几代增值力下降，因为原代时已经有大部分神经干死亡，所以你需要控制原代神经球的大小，不是非要到7d才传代。2. 原代组织消化最好不要用胰酶，会粘连，建议用Accutase  sigma的 3. 培养瓶养是不会贴壁的，如果贴壁是你原代处理的不好