关于SD大鼠BMSCs，原代培养就发生了老化现象的原因？

苏木素黎

关于SD大鼠BMSCs，原代培养就发生了老化现象，可能是哪些原因导致的呢？. G  t4 r! [. B. w
大家培养该细胞传代时所用的胰酶浓度是多少？0.25%的浓度是不是对细胞伤害有点大？7 X( Z1 P, T; z2 ^3 `7 y. }
我是菜鸟一枚，恳请大家帮忙解答，谢谢！

fm001982

+ Z4 [7 P3 j& n# X- N$ \9 C3 m* p
. s# B! H0 [: U  ]
新手的话胰酶建议用0.125%的，边消化边观察，传代一般2到3分钟就可以了。
! r1 Y* w4 o0 Y$ R0.25%的浓度可以用，但时间要把握好，传代一般1分钟就消化得差不多了。
( [' M. ]! O; z/ Z" Y' a还要注意你的培养基，如果是买的话，注意酸碱度是否适宜，自己配的话注意渗透压。
" W) l; m7 G; a3 O' K* [另外，接种的浓度也有一定影响。

sports123

这个浓度可以的，注意的是不要消化时间太长。

苏木素黎

回复 sports123 的帖子1 a1 w& n- e2 l9 a5 B" Z
8 ]3 B$ \3 u% B! `" s
3分钟可以吗？

苏木素黎

回复 fm001982 的帖子
2 C+ g0 |( g# R0 D1 k1 V3 G
& c0 e# b3 E& h- A谢谢，很有帮助

sports123

回复 苏木素黎 的帖子. b. |2 S9 D6 T# m
. k! ]1 W0 b2 u& Z1 ~
3分钟时间有点长，一分种左右即可，具体情况视细胞密度而定。

honey棉花

这个浓度可以，胰酶使用前需要预热至37℃，消化前需要用DPBS洗一遍细胞去除血清等，这样消化的时候只要30秒-60秒就差不多了，一定要主要观察，消化过了损伤细胞，细胞也容易出现老化现象

苏木素黎

回复 honey棉花 的帖子
( c$ G; J! v6 s, ?9 o; }! O. {8 S$ e* h/ b
好的，谢谢，原代培养时细胞中含有许多杂细胞，如果消化一分钟，其中大部分好像都是杂细胞？

hyyh03271016

这个浓度的话，消化时间1-2min就可以了

晗晗

这个浓度可以，但是不要消化的时间长了，消化太长时间细胞会有破损，或者可以浓度小一点，消化时间长一点