脐带间充质干细胞培养问题

a565170383

胰酶0.125%培养瓶内消化2分钟OK

xiangxu

消化不完全，物理吹打的结果！
& I/ y: R3 [0 ^" E用0.25%的胰酶（加EDTA）消化,10分钟以内即可。

风信子deon

刚刚入门，学习下

cjq12862

考虑两点：
" Z$ S& P4 `+ t" h0 e$ }' h1、是否细胞培养时间过长；+ o, x0 s* Z, i. ]
2、是否存在污染。

小样

细胞消化食呈片脱落，可同一代次为什么也会出现？有的呈片有的呈沙状脱落呢？求高人指点。有人说因为细胞密度过大，有人说消化时间长，到底是什么原因呢？？？

细胞海洋

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6 B# w9 N& m6 ^2 V
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小样

回复 细胞海洋 的帖子7 @$ [9 s# n" H0 O8 E5 [

& d, n8 L2 Y- U# p恩恩，谢谢

309208770

回复 shuimochunlan 的帖子& ?% [8 [2 m% H  `& `3 Z# m# N
# d8 s0 q1 P  ~7 n0 Z% N: m5 {
细胞长成膜状，是长得太满，消化时不容易成单个细胞消化，培养传代时这样的细胞不容易贴壁

维维睡啦

原因：你的细胞长过了，没有及时对细胞进行处理造成的。细胞融合率高，细胞排列过于紧密，细胞与细胞之间粘连结实。消化时，细胞成块脱落，粘在一起形成膜状，消化的时间再长也是没用的，反而会伤害细胞。不过这种现象可以继续传代，传代比例可以稍微加大。8 p( _) {" D3 S' |7 d, I1 v( o
解决方法
. x1 ^& q. O. I& ]1、以后培养时，细胞融合率达到80%左右即传代。% p. S) S: G+ v5 m: o+ z. B
2、加大传代比例。
- O8 E% h, n0 k; \3 ~3、适当减短细胞培养周期。
/ K5 N2 _, U+ T" N) P6 M4、养成经常观察细胞长势的良好习惯，及时对细胞进行处理。

neng172

1、细胞长的太满的，下次长满80%左右就要传达了
+ n2 G# \$ I# g) H  t( Y2、或者改用0.25%的胰酶消化