肿瘤干细胞基因表达情况的分析

jitianxing7021

战友们
% J6 f7 u4 z5 K9 y8 m我最近利用球培养筛选干细胞
7 `9 q; @: h  {5 s: Z8 V最近RT-PCR 结果表明筛选的球形成细胞干性基因的表达水平低于原来细胞株

hcoohboy

回复 1# jitianxing7021 : c5 u/ z/ V1 X) [5 j4 ~+ ~) F, w

/ F% U7 H) R( i% o% F( F) A7 i& e, O3 h; b7 `% n6 r/ O" s, z
    1. 首先是否确定你的球培养体系成功建立？
+ _$ u! T' c6 c* {) k    2.你选择了哪些些干性基因？可能不是所有的干性基因都会上调
6 X* ~9 H6 C5 w) N. x7 z5 u! d) p    3. RT-PCR存在假阳性，再重复试验或用免疫荧光检测
, n% {5 U8 S/ P& Y3 i5 ?: R2 `( c& c6 j2 }! X; B
个人建议

jitianxing7021

回复 2# hcoohboy ! I3 F' r8 i# g/ T
# \/ _0 \! z# P2 v/ d- ]

0 S8 B- X0 c- @" {    我的干性包括BMI-1 NANOG,NOTCH-1,ABCG2
' b5 d9 F1 [* p4 M; s/ Z    我在想是不是接种的细胞密度有关系了
3 ~! m0 C) X" s  我的球细胞已经传代了二十代了
; k4 v& n4 O! ]8 {  a( J% c7 [% a1 ~应该建立起来干细胞

jitianxing7021

免疫荧光做了一个beta-catenin- l7 m. e' G8 ]4 s, x
发现成高表达，在细胞浆和细胞核内

hcoohboy

回复 4# jitianxing7021 ; g# `9 e  x: f2 M+ M. O/ H
' A# l) z5 f' K( ?7 T

( i, M9 V$ R6 D. r# T3 M( o    这个结果还是不错的！

hcoohboy

回复 3# jitianxing7021 2 x( x/ a5 d/ _* ?6 h2 ^

# C1 M- J; I8 W# T$ W  ]+ S! u9 i  F: B. B
    试一下向裸鼠皮下打瘤，这是金标准

jitianxing7021

是的/ x6 z5 X. B1 M( Y) h$ z
这个说的对！但是我想把基因表达做好, `8 o: ^! \8 ]! o" |
因为现在功能试验已经没有新意了# O8 p' s' u: F0 s: D1 i
现在关键是能找到肿瘤干细胞特异的表达因子

xiongliangxl

学习关注中~希望楼主继续汇报实验进展~顶~

hcoohboy

回复 7# jitianxing7021 % A: b' m) ~4 ]+ T& ^

+ S, t5 g7 f. g; r
% u' @6 p  `! f) D    但这个比较耗神，可能最好做芯片，才能筛到新的调控因子什么的~

wzx6660

支持，很有参考价值