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楼主: zerollx
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慢病毒转染的原理及过程(个人理解,求解惑)   [复制链接]

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发表于 2012-10-12 20:44 |只看该作者
我们也用的293T,其他种类的细胞我也用过,不好,建议不要用,还有,你的思路很清晰,过程正确
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发表于 2014-1-11 20:09 |只看该作者
回复 shihuijunm 的帖子5 r0 w2 L" p; j& l3 q

7 X9 h6 y* g" g/ ^The 293FT Cell Line, a derivative of the 293F Cell Line, stably and constitutively expresses the SV40 large T antigen from pCMVSPORT6TAg.neo and must be maintained in medium containing 5 @! Q! y& T0 v; [
Geneticin. So it's different from the 293 T cell line.
; U; q! i& r( S& l% ]; ]  xBest regards!
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发表于 2014-1-11 20:16 |只看该作者
回复 greenjing 的帖子
) D8 n! z! Y& y: K9 U8 f+ T- ]8 E& E- G1 @, A
There are so many factors  influncing your transduction efficiency:1. MOI too low; 2. Too much antibiotic used for  selection; 3. Cells harvested too soon after  transduction; 4. Gene of interest is toxic to cells; 5. Non-dividing cell type used etc.
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发表于 2014-5-14 19:57 |只看该作者
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回复 zerollx 的帖子2 ~4 Y7 t* T5 }3 S* n9 N+ D

) i- N3 @' N( |; c1 n好像看有的说F的意思就是fast,生长速度比293T快,它们两个都是整合了SV40大T抗原。具体的也不是很清楚。
. k3 D: s6 }# d; ~; o7 gThe 293FT Cell Line is derived from the 293F Cell Line and stably: z; V7 g, n5 X# f  Q
expresses the SV40 large T antigen from the pCMVSPORT6TAg.neo plasmid.
3 Z; H5 I$ k# `. _Expression of the SV40 large T antigen is controlled by the human cytomegalovirus
8 V. c0 P6 W0 V0 t) I$ U9 z; U(CMV) promoter and is high-level and constitutive. Studies have demonstrated maximal virus production in human 293 cells expressing SV40 large T antigen (Naldini et al., 1996), making the 293FT Cell Line a particularly suitable host for generating lentiviral constructs using the ViraPower Lentiviral Expression System available from Invitrogen.
, e. _% a1 D( s# MThe 293 Cell Line is a permanent line established from primary embryonal human' ]  H* f1 z0 h1 ^
kidney transformed with sheared human adenovirus type 5 DNA (Graham et al.,
1 I; E: J8 |9 x  ]# J( q1 _5 d& T1977; Harrison et al., 1977). The E1A adenovirus gene is expressed in these cells! _6 }- ]  e) G. u$ }' c$ o
and participates in transactivation of some viral promoters, allowing these cells to+ Y% F; f% j2 \7 h9 H
produce very high levels of protein.
  M; L1 }4 t& X! TThe 293-F Cell Line available from Invitrogen (Catalog no. 11625) is a fastgrowing6 E  u7 z/ I. Y' d, j
variant of the 293 cell line, and was originally obtained from Robert Horlick at Pharmacopeia.- O: w3 i' D% W) S2 C/ d- D1 L
这个以供参考!
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发表于 2014-6-16 12:46 |只看该作者
不错。
/ t5 G4 R! l& O

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发表于 2014-8-14 13:57 |只看该作者
如果不包装病毒,直接用脂质体2000转染目的细胞,比如MEF,结果会怎样呢?目的基本是不是也能转染到MEF中去?
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发表于 2014-8-15 08:29 |只看该作者
回复 小兔子lp 的帖子4 O" B  S9 s9 Y" }& q  A
! j# E% v' Y5 ]8 o% i% _! S  d
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发表于 2017-5-31 12:35 |只看该作者
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发表于 2017-5-31 12:35 |只看该作者
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发表于 2017-8-6 19:21 |只看该作者
实用,多谢
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