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微笑流滢

新手上路

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楼主

发表于 2017-3-1 14:33 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

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扩增出一个高GC含量的片段后，连接到了T载体上，现在想将片段中一段18bp的碱基删去，也就是突变掉，大家有没有什么好的建议？现在就是在删除的片段的两端设计引物，把整个质粒PCR出来，然后加连接酶连接，再转化，但是由于GC含量太高，每次测序出来的要不就是删多了片段，要不就是删了18bp,但是有移位，该肿么办？

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