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今天养MEF过程中发现的问题,请教大家   [复制链接]

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楼主
发表于 2010-5-1 17:45 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
今天我要复苏ES细胞,对MEF进行丝裂酶的处理。处理前六孔板上MEF还是铺得80-90%汇合的,但是三个小时的丝裂酶处理后,发现MEF饲养层变了,如何变请看图,图一为处理前,图二为处理后,红色区域为无MEF区域。。。
1 W3 d! i; X* X/ R1 L- w
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沙发
发表于 2010-5-1 19:33 |只看该作者
你这是怎么拍的图片呀 红色的来个特下吧
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藤椅
发表于 2010-5-1 22:21 |只看该作者
楼主,贴张真实的图吧。您这有点抽象啊!
4 O) E+ \7 v* W丝裂霉素的量是多少啊?会不会太高了。
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板凳
发表于 2010-5-1 23:13 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
红色区域可能是凋亡的细胞?
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报纸
发表于 2010-5-3 15:12 |只看该作者
哇,太卡通了吧?到底怎么个改变啊?!

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地板
发表于 2010-5-5 13:45 |只看该作者
我倒感觉到是你自己用枪头或移液管吧那些地方的细胞给刮掉了,不然不会出现这种情况的
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发表于 2010-5-5 17:31 |只看该作者
向大家汇报,用的是10ul/ml丝酶,而且绝对不是换液时吹走了。暂时没有光盘复制下来,不好意思
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发表于 2010-5-5 17:34 |只看该作者
还有,今天又碰到了一种情况,我用的是六孔板养的,发现MEF从孔边缘往回缩,有的缩成一个乳白色不明物体,应该是MEF组成的,本来是长得很密的,结果缩了以后就基本上变没了,郁闷。。。也是第一次碰到这种情况。大家有没法啊?就算MEF长得好,我复苏的干细胞也长不起来,太背啦,大家指导一下啊。。
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发表于 2010-5-6 10:33 |只看该作者
还有,今天又碰到了一种情况,我用的是六孔板养的,发现MEF从孔边缘往回缩,有的缩成一个乳白色不明物体,应 ...
* f* g+ b8 v2 i7 Bcony 发表于 2010-5-5 17:34
/ @6 n+ i$ c6 ~6 a8 p
% s2 ^- {5 i& g$ F) S+ n. F, a
/ U- @; `8 I$ z" c7 F! w
    我好像也遇到过这样的问题。不过很怪的是 ,6孔板中只有一个到两个孔是这样。% e4 G- }. m  P( m9 J4 R7 _9 A/ H% N

7 K9 @+ p1 m8 \; W$ y' P  p; p2 I( G0 C怀疑是 6孔板的质量问题。
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发表于 2010-5-7 21:24 |只看该作者
个人觉得可能是MEF的状态不好,细胞密度比较高,被枪头刮到的地方容易脱落。不一定对哈。
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