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楼主: 龙之吻
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[请教] WB实验问题,谁遇到过?   [复制链接]

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金话筒 优秀会员

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发表于 2011-7-11 09:46 |只看该作者
回复 龙之吻 的帖子
! r" c; P; K  z5 _- f7 y, ?/ S% c, F  M% V/ p
可检查下你的电泳缓冲液上样缓冲及配胶缓冲液中有无SDS8 R4 G4 h, [1 z- K  z6 I
2 w7 N0 n: P4 S% T8 ?4 U
你个这问题不是抗体问题,转移问题,7 }& _" l5 g7 O, R7 r6 C6 c" e
很可能是跑胶的问题
: G# O2 n. T2 |
) n  u  w  @% o' U% D: g5 U6 _" W以前一个本科小朋友帮着配跑胶溶液,结果跑胶带型怪异,反复检查后发现是没有加SDS。你可检查有无SDS。
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发表于 2011-7-12 11:17 |只看该作者
我个人觉得,既然是单抗,那你应该多注意封闭时封闭液的浓度及封闭时间,而且也应该加入DTT。
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发表于 2011-7-20 20:51 |只看该作者
个人认为,换掉样品试试,用其他的组织再做一次,排除样品问题;同时换一种封闭液,如低浓度的明胶,我想总是能排除你的问题的
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