大鼠生精干细胞的培养

sunny218

各位高手们，我才开始做SSC，做了两次都不是很成功，想向各位高手们请教一下。7 C( D- z3 R" V
1，要用什么方法去分离纯化大鼠的生精干细胞会比较好？3 j5 q  ?/ R+ L* j
2，用什么培养基才能在体外长期培养？  |3 n8 |4 ?1 L" G% a$ n5 o0 _$ i

" R8 R1 Z& y# f9 i
$ I  M" q% |4 [) O9 @2 ~9 b% o          谢谢各位啦！！！

490096812

刚开始，你就用普通的就可以

sunny218

普通的什么啊？DMEM？还是DMEN/F12  ?

490096812

都行，我们第一种撒

细胞海洋

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6 N; j- l3 E) F  I你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
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否则他会看不到
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sunny218

回复 细胞海洋 的帖子2 X5 C( `; R& {

6 f' o8 W8 o$ {: ]' J* y3 R7 G好的，谢谢！

sunny218

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# g# ^- ~8 J  s0 E. L; v那你们适用什么方法分离纯化的啊？怎个过程都是要无菌的吧？我可能是不太熟悉，经常会污染，要么就是细胞第二天就都死啦！！！谢谢你的回复啊！！

w343989328

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8 P5 R7 V" X; u( x% }为什么会那么容易污染呢？你分原代细胞，培养基里面肯定要加双抗的啊。起码传个一两代再把双抗去掉吧

w343989328

纯化的话，视你的目的而定。如果只是单纯的建系，而且还处于摸索阶段，那么我建议你用差速贴壁法。这是比较经济的做法，而且现在大鼠SSC的marker尚无定论。SSC的培养体系比较复杂，具体的你可以看点文献再做决定。brinster团队和T.shinohara都是这方面的大牛，Dym Martin也有不少工作

qingchen

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7 n% z: X- _+ r* X9 Z2 ^3 d$ t* o0 n% `1 u' t4 `  h
两种抗生素没加么？还是液体没有消毒？还是消毒方式有问题？还是操作时未注意无菌？总之污染的因素很多！有时候即使液体有一点细菌的话也会感染的！另外你用什么牌子的滤膜：？滤膜不干净也可能造成污染啊！