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楼主: Zhouhaiyan12388
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干细胞培养是不是要特殊培养基   [复制链接]

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发表于 2015-12-1 08:53 |只看该作者
维持的话,早期用feeder养时,用的KSR加bFGF;现在有更便捷的培养基,E8和mTSR1,后者更贵,一瓶500毫升2000多。B27和N2一般在进行分化protocol时才用。
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发表于 2016-1-13 23:17 |只看该作者
本帖最后由 liqiang8589 于 2016-1-13 23:18 编辑
, j  B1 Z2 y7 B* b4 j
; g( o. I4 m) K# n& q, e) C& m2% --- FBS+ L$ ?; @% X6 S0 N1 A$ a0 @
5 ng/mL --- rh FGF basic# a6 I! S1 c, G, S6 H
5 ng/mL --- rh FGF acidic' s# d# P$ h9 e0 x
5 ng/mL --- rh EGF! |4 S4 @- r8 C4 T6 J8 T
2.4 mM --- L-Alanyl-L-Glutamine$ T  \6 L* q$ z$ h# c
---------------------------------------------+ L1 A. M+ \/ ?. c
+双抗
; u2 ^+ M$ w' U* F这个是在ATCC网站上找到的---低血清人间充质干细胞培养液
8 o' n9 p( @$ B0 {" K现在论文好像都都在用DMEM-low glucose培养液为基本培养液
: L0 D2 ]( F: N5 i3 \0 t
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发表于 2016-1-19 14:58 |只看该作者
干细胞培养一般是DMEM等营养较全面的基础培养基,加一些相关细胞因子比如kGF,EGF,bFGF等。根据培养细胞类型添加血清。基础培养基+细胞因子+血清(+饲养层)+双抗。
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发表于 2016-5-12 15:22 |只看该作者
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可以参考文献或者专利,有的干细胞比较好养,基础培养基DMEM/F12加血清就好了,但是血清中的一些成分会导致细胞衰老或者分化,如果传的代数不多,基础培养基就可以满足培养要求。如果传代数多,或者对细胞质量或者数量要求比较高,就可以用专用干细胞培养基,那些培养基会要求加少量血清或者不加血清,对细胞分化影响比较小
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发表于 2016-8-26 19:21 |只看该作者
哇!感觉这个帮助很大!但还是没有弄明白是加血清还是不加 ?

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发表于 2016-11-17 14:27 |只看该作者
我们实验室用的是& D7 h* k5 t5 o# _) O2 w
15%ksr+ I0 ~, r" i  [$ ?0 S' d
高糖DMEN1 m; J; Q2 r0 ~
1%NEAA6 v( z! V, q2 ]( A2 e
1%Pruvate9 O- Y9 k7 j5 [7 H4 L0 N# }
1%Glutamine! q+ X+ j0 \* G
1%双抗
! [4 r7 o' `' K6 i6 |1%FBS
. L5 b1 O6 y; R* }8 j! y$ ?: e0.1%LIF外加beta巯基乙醇
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发表于 2017-3-8 10:18 |只看该作者
这要看你要保持干细胞的全能性还是要分化成其它细胞了。& e* o6 i+ m5 ]5 h: B" w/ o) D5 V
如果是iPS的话,如果是要保持全能性,好像普通高糖的DMEM就行,不过就是要每天换液。我们实验室用的是ajinomoto的ak02,可以保持很好的全能性。
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发表于 2017-4-24 08:55 |只看该作者
干细胞培养基一般加了一些特定的细胞因子,避免分化;一般多用无血清培养基,而且不同类型的干细胞所需培养基的类型也不相同
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