液氮罐内冻存细胞是否会污染？

rongcuizhen2005

各位，请教，之前我们实验室液氮罐冻存的细胞取出后，微生物培养结果，结果有长菌？不知道是不是液氮罐内引起的污染？请高手给分析一下

tjbone

应该是冻存前被污染了！！！！！

歪歪

有一定的可能性，很多微生物在液氮中是没办法杀死的，而现在市面上的冻存管口为了适应温差，热胀冷缩的时候不至于爆管，都是无法密闭的。所以液氮罐中的液氮是可以从一个管子进入到另一个中。特别注意是支原体，来源广泛，防不慎防。所以现在有些大的实验室，采取非接触式的液氮循环系统，来保存一些比较珍贵的细胞系。

canoecheng

也不排除解冻时候的污染

xiaolong

可能是冻存时就已经污染了，再要么复苏时不小心污染的

weibin2002

有可能是你冻存时细胞就污染了或者是复苏时候某些细节不到位引起污染的吧，* ^$ `. B4 P0 a) L: O: W
我以前复苏过一次在液氮里把管冻裂的细胞，融化后发现管上有个裂痕，有酒精多喷喷就复苏了，也没有污染，呵呵！

rongcuizhen2005

回复 歪歪 的帖子
) _) d0 }% ]/ \. f9 j: i1 c) q, w
+ M' S0 }! w% g冻存之前一般我们实验室都会做微生物培养的，没有问题，但是解冻时就出现污染情况，请问是不是冻存液污染引起的？有没有这种可能性？冻存液的成分是DMSO/血清/DMEM

sdwzg119

我认为从水浴中的水里带入污染的可能性大一些！! b( k: g5 F# R7 r) {* x) h* w  h

歪歪

为了排除水浴锅的问题，那你可以试着水浴锅中的水加热100°，灭一下。或者复苏的时候拿一管放在培养箱中复苏，尽管细胞状态不好，起码可以排除外援引入的污染。9 j  r' p: |, s
还是不行的话，估计就是冻存液的问题了。我们实验室冻存液都会过滤一下再用。

rongcuizhen2005

回复 歪歪 的帖子4 N! A8 ?2 H0 ?# |) X

* U$ i5 O  n& l9 a但是冻存液中有DMSO,可以过滤吗？会不会对滤膜有影响？