为什么培养基一放到培养箱里一小时就变黄了 - 实验室综合讨论区干细胞之家



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zxdlala

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楼主

发表于 2011-5-12 15:48 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

分离细胞的时候就这样，还以为是操作时候污染了，后来只弄了点培养基装到培养瓶里面放到孵箱里，还是不到一小时就变黄了，怎么回事啊

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沙发

发表于 2011-5-12 15:53 |只看该作者

培养基的缓冲系统不好吧。有加NaHCO3么？

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zxdlala

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藤椅

发表于 2011-5-12 16:14 |只看该作者

是买成瓶的hylone的，就加了点血清，然后调了下ph值，用稀释后的NAOH调的。别的什么都没加，以为是支原体污染了，因为液体都很清亮，但是在外面就没事，一放到孵箱里就变黄了，再拿出来又变红了

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板凳

发表于 2011-5-12 16:48 |只看该作者

缓冲液加得少了

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HMC

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报纸

发表于 2011-5-12 18:04 |只看该作者

缓冲液的问题

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生物化学zy

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地板

发表于 2011-5-12 21:51 |只看该作者

个人见解:是缓冲体系的问题.一般培养液中的缓冲体系应该是NaHco3,使用酚红为指示剂.培养液偏酸会变黄,偏碱会变紫.同时培养箱也可以进行自动的调节,培养液在超净台中开盖放一段时间会变紫色,放在培养箱中会自动变回来.我们实验室使用gibco的DMEM,需要添加NaHCO3

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amberma

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7楼

发表于 2011-5-12 22:38 |只看该作者

建议检查下培养箱的CO2是否正常

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genedu

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8楼

发表于 2011-5-13 01:51 |只看该作者

属于正常问题，PH的改变必然会导致颜色的改变

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jhu132llh

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9楼

发表于 2011-5-13 10:23 |只看该作者

培养箱中5%的CO2
培养基放进去以后PH肯定会改变
所以肯定会变色的

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zhangyan813

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10楼

发表于 2011-5-13 10:52 |只看该作者

有那么明显吗，从培养箱中一拿出来就变红？我用的一种无血清干细胞培养液就是黄色的，一开始以为哪里出了问题，后来测了PH值一切正常，用来养细胞也很好的。但是这个黄色是很稳定的，不会很快的变化，所以我认为楼主的培养液应该是缓冲系统的问题。建议楼主：1.拿一点其他经典细胞试一下这个培养液，看看有什么影响；2. 换培养也，买GIBCO的粉剂自己配制，这样会好很多。

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