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[请教] 请教干细胞传代是用胰酶消化和细胞刮哪种方法更有利于细胞生长   [复制链接]

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金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2016-7-25 19:51 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 细胞海洋 于 2016-7-25 20:37 编辑
! A6 }; s& N5 \& l! S# h4 E, y( ^, d! W5 q
干细胞传代是用胰酶消化和细胞刮哪种方法更有利于细胞生长
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沙发
发表于 2016-7-25 19:56 |只看该作者
回复 qinchuanniu 的帖子8 D: ?7 O) s( ?7 m* S+ p
8 K5 u2 a" |) T' @. G' i, E
选择胰酶消化会好些。但要严格掌握好酶的浓度和消化时间,否则也会影响细胞生长。
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金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2016-7-26 08:43 |只看该作者
一般都用胰酶,边消化边观察,很快就可以终止消化。8 p8 c3 m  P. ~- ]& v) U
P1至P5代都是没问题的。
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板凳
发表于 2016-7-26 08:55 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
一般都是用胰酶消化,刮的话,还真没试过……
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报纸
发表于 2016-7-26 09:02 |只看该作者
现在的生物公司都是用姨酶消化   0.25%姨酶原液稀释一倍为0.125%   消化时轻轻拍打瓶壁    边消化边观察  不要静止消化    时间不要超过两分钟   消化完成立即用上清终止消化     希望对你有用   
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地板
发表于 2016-7-26 09:25 |只看该作者
胰酶, 记得稀释为0.125%,以及消化时间尽量短,不能持续消化。
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发表于 2016-7-26 10:01 |只看该作者
回复 yinfuhua 的帖子8 C8 Q. J1 {' C* r. {$ N
# m  g% P/ }( @: c  J9 g
你看是哪种干细胞 ,有的干细胞不适合用胰酶消化,例如诱导多潜能干细胞,你问的太宽泛了,要具体指出细胞类型,大家才能帮你
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发表于 2016-7-26 10:34 |只看该作者
没有人推荐Accutase吗?相对胰酶要温和一些,对于细胞损伤小,而且细胞分离得很完全。最开始用的Millipore的,但购买起来不方便,现在一直在用Gibco的,感觉也不错。说明书上还特意说了不用离心,不用终止消化。
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发表于 2016-7-26 10:35 |只看该作者
回复 lgfffancy 的帖子7 @/ F3 t8 j) R- z- D% O
+ a: l" z  L, ?/ Q  i
我做的小鼠胚胎干细胞,用的都是0.05%。买的0.25%的,自己稀释了5倍
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发表于 2016-7-26 16:46 |只看该作者
用胰酶消化吧,没试过刮
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