大家冻间充质干细胞的时候冻存液比例是多少啊？

维维睡啦

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1 d, ?5 [5 D3 m9 j2 ]放不放双抗主要看你所养的细胞是否用于临床或治疗了，加双抗本身对细胞培养基本没有影响，但是用于临床和治疗的话，国家的一些规定是不允许加抗生素的，抗生素可能会对受治疗者本身产生影响，比如过敏反应什么的。

chenlin080102

建议买现成的细胞冻存液，这样复苏得率更高，冻存密度为400万/ml

杏色玻璃

维维睡啦 发表于 2015-5-5 12:58
/ b: `/ X# }0 w- ^: g' R( Y你的FBS量太少，想省钱的建议用DMEM：FBS：DMSO=5:4:1的，这个比例还是比较好的，用的也比较多。培养基别加 ...

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加双抗对冻存会有什么影响呢？

yuanyecat

我用是商业冻存液，德国美天旎，主要用于临床的

yuanyecat

我用是商业冻存液，德国美天旎，主要用于临床的

sunnyhuan0629

我觉得是得看你平时培养时用的培养基是FBS的还是无血清的。如果是FBS的，那么直接拿日常培养的培养基+10%DMSO 就可以的了。如果是无血清的培养基，直接按这个可能复苏效果会打折扣。这时候可以按照你本来用的DMEM：FBS：DMSO=7:2:1进行冻存，只不过复苏的时候，可以选择重悬的培养基里添加一些ROKi inhibitor ，一般终浓度为2uM即可，这样可以大大提高贴壁细胞的存活率，我们一直是这么操作的。

听不到

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! E/ v% }3 Y/ d" J- b" D懂啦，谢谢啊~

听不到

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' P9 ]- s! S/ u4 \( W3 S3 h; p看21楼，他回复了已经

听不到

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1 ^1 u' w$ H8 D. y. w; E我平时用的就是含10%FBS的培养液，然后冻得时候是拿DMEM：FBS：DMSO=7：2:1都不行，如果直接拿平时的培养液加10%DMSO的话，血清比例不是更少，那不是对细胞更不好么...

暖羊羊

血清是细胞冻存的关键因素，通常我们的冻存液会用血清：DMSO=9:1，或者无血清培养基：血清：DMSO=5:4:1，来冻存MSC，通常细胞浓度是2×10^7个/ml冻存液。