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楼主: namulow
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[其他类别] 干细胞标记及追踪(专题讨论)   [复制链接]

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发表于 2011-12-4 01:20 |只看该作者
磁性材料标记追踪:
6 G! n; m& i" N4 H& n$ V' @磁性标记用于追踪受标记的移植细胞在体内的运动信息,从而得知移植细胞的未来命运。通过MRI技术对干细胞进行可视化和追踪,需要将干细胞进行磁性标记以便它们能与其它组织有所区别。(superparamagnetic iron oxide particles)SPIO相当于MRI造影剂,方便追踪。但是SPIO可被降解、代谢, 一般经过5-8个细胞分裂周期后就会消失。
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发表于 2011-12-4 01:21 |只看该作者
Y染色体标记细胞追踪移植细胞技术 选用雄性供体和雌性宿主,利用Y染色体作为标志物,最大的优点就是标记技术简单,而标记效率很高,利用FISH技术进行追踪标记的细胞能清楚的观察到。适合长期体内试验定量分析,但是FISH检测技术比较复杂
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发表于 2011-12-4 01:37 |只看该作者
另一种长期标记方法:人MSC回植动物体内,检测HLA,与Y染色体标记相似吧
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发表于 2011-12-4 01:44 |只看该作者
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本帖最后由 namulow 于 2011-12-4 01:45 编辑
: F8 Z1 p8 Y5 Q4 [0 Y
% w+ @; q0 [% `回复 namulow 的帖子
: l# r% v# p6 B) \2 s; w1 x+ j: w; x  A. U0 f* d. I+ L( x
The BrdU labeling signal quickly decreased over time. Thus, BrdU should only be used to temporarily label dividing cells.
8 ~: X1 l' `4 X3 a: F! _ DiI and FISH labeling may be used to steadily trace cells during invivo experiments.

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发表于 2011-12-4 02:07 |只看该作者
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1 a* N8 s) @& e. [0 u3 Y3 n8 i0 ~9 T- n: I! l  ?1 B
SPIO可被降解、代谢, 一般经过5-8个细胞分裂周期后就会消失。
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发表于 2011-12-4 02:45 |只看该作者
DIL BrdU FISH三种标记方法随传代而发生的标记率变化
( i0 w9 Y, f/ f3 |2 P R(7T%~A}V%RMSX}_V20E%3K.jpg
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发表于 2011-12-4 02:53 |只看该作者
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发表于 2011-12-4 10:43 |只看该作者
在我们研究的领域里,用来标记干细胞的方法一般有Brdu标记滞留,特异性表达在干细胞上的膜蛋白、核蛋白。追踪这些分子的变化可以用来追踪干细胞在在体中的变化。像楼主想追踪外源的细胞在在体中的变化情况的话,只要标记好了这些细胞就可以了,我觉得最好是从基因组水平去标记,像GFP片段的整入,这样的修饰可以确保信号的强度不会减弱。而像Brdu、Hochest会随着细胞的分裂增殖而导致有一部分细胞信号的丢失。
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发表于 2011-12-4 19:01 |只看该作者
以上说法各有各的理,不过我的意见是GFP 是个金标准。
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发表于 2011-12-4 19:02 |只看该作者
以上说法各有各的理,不过我的意见是GFP 是个金标准。
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