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楼主: 绿雪
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[讨论] 求助:细胞空泡化,生长停滞     [复制链接]

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金话筒 优秀会员

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发表于 2010-5-31 15:34 |只看该作者
看样子是支原体污染,上传两张图片,搂主比较一下,最好看看没有细胞的那一张,你的出现这种情况没有,如果是。建议使用plasmacin!可能还有救!

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发表于 2010-5-31 23:15 |只看该作者
首先,你做的是传代还是原代,我养的MC3T3到40代后细胞内也会有许多颗粒状的东西,是细胞老化的表现,如果是污染的话细胞应该早就死亡并飘起来,不会和细胞共存的。并且污染物一般都会快速增值并占满整个视野,不知道后来你是否出现这种情况。如果是老化的话可能是你处理不当,或者改用了血清之类的。此外,那些细胞旁边的黑色颗粒我觉得可能是细胞碎片。
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发表于 2010-6-1 16:30 |只看该作者
那些颗粒状小体会不会随着时间变多?考虑应该是污染,实验室最近有人白色念珠菌污染,镜下看起来很像,楼主参考一下吧~
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发表于 2010-6-1 20:31 |只看该作者
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你的黑色点点会不会动的??

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发表于 2010-6-2 17:18 |只看该作者
有些学者推测黑胶虫对细胞并没有害处,反而有修复细胞的功能。你这个可能是支原体感染。不过具体是什么?需要你设计一些小实验来验证具体是什么,说不定会有新发现,加油!
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发表于 2010-6-2 17:37 |只看该作者
我的细胞HUH7也出现这种情况,天津TBD特级养的,背景很脏,而且可以看到好多小黑点在动,但培液不混浊。两三天不换液的话细胞会被这些小黑点吃掉,细胞完全裂解成黑色絮状结构。换了进口血清后,情况明显好转,建议换好的血清。。。
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发表于 2010-6-2 23:03 |只看该作者
本帖最后由 绿雪 于 2010-6-2 23:08 编辑 5 x& g. t6 h3 b5 h

. o/ H$ x6 Z8 @3 l非常感谢大家的关注和帮助!细胞是第四代的,看细胞这种状态,后来我10天左右不去换液,培养基一直不会变浑浊,都差不多那样的,只是那些小黑点越来越多。高倍镜下能看到那些小喝点在动的,而且一开始好像都是在细胞里面的,然后细胞核就逐渐溃散了,但细胞不会飘起来。
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发表于 2010-6-9 21:33 |只看该作者
回复 8# 大刀无敌 * U7 S, o8 A, M
* A# o( M1 H& G
我查了关于支原体污染的资料,确实有点像。
, X$ m: w' f5 ^1 B" X9 T2 h    “支原体污染后 ,因它们无致死细胞毒性,故可与培养细胞长期共存,培养液一般 不发生混浊 。轻度污染时,细胞无明显变化,外观往往给人以 正常的感觉,实则细胞受到多方面的潜在影响,合成,抑制细胞生长;污染较严重时,细胞间隙和细胞内都有大量的黑色小颗粒,细胞状态明显不好 ,如折光消失,缺乏立体感等。”
5 K& j: [8 i. c) U% N* ?! Ehttp://www.bioon.net/bbs/viewthread.php?tid=313571
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发表于 2010-6-9 22:22 |只看该作者
说“黑胶虫是一种根本就不存在的东西”有点武断。这些黑点可能不是生物,但也有可能是。我同样不赞成轻易用一个不知道是什么的东西来试图解释手中的现象,认真寻找原因才是正道。
- D" ], v/ h9 L; A作者说,“培养液没浑浊,细胞也不会死,放置几天都一个样”,这说明可能不是污染,但并不能说明黑胶虫不存在。我觉得这应该与污染关系不大,很可能是血清质量不好,或者血清在解冻时没有处理好,导致培液里面营养物质被变性沉淀造成的。
. t# @! C' P5 N  f我觉得问题是搞清楚这小黑点是什么时候出现的,这样可以缩小找原因的范围。
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金话筒 优秀会员

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发表于 2010-6-9 23:01 |只看该作者
学习了。
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