第七天（8月21日）上午，观察GFP表达情况

泡沫清风

接种质粒后24小时，观察GFP表达情况：( k- }) x" r7 g% d% u* v. _

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8# maz_2008 9 O0 y- C( ^: D
你的这句话好像不太对。我也是用脂质体来转染载体的。病毒本身不是载体。病毒是由三个或四个载体包装而成的。（一般逆转录病毒是三个载体系统，慢病毒是四载体系统）
4 R8 r! t" m0 l* ~只不过不同的是一般所谓的脂质体转染是转染单载体，直接转染到目的细胞。这样只能做到瞬时转染。! e: }) h4 N( l: ?. e4 h* w
而病毒包装是把三个或四个质粒一起转染到包装细胞系，生产病毒，再感染目的细胞。DNA能整合到基因组中，能得到稳定转染的产物。当然这要筛选过。  _8 r& y& N! M0 F+ L: B% O& r3 ^, H
我就是在一般的超净台做的，不过最近做的有点虚，所以我强烈建议老板买了安全柜。虽然我们包装形成的病毒并不是活病毒，但是我觉得还是有点危险性的。特别是他的胞膜蛋白是泛嗜性的时候，所谓的泛噬性一般就是只所有物种都能感染的。比如我用的VSVG就是这类。所以凡事沾过病毒的器械和耗材都要在消毒液中浸泡过或高压过。而且做慢病毒应该比逆转录病毒更加注意。因为逆转录病毒只能感染增殖期的细胞，而慢病毒也能感染非增值的细胞。

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12# hcskrc % D& D+ N3 V& H; c0 B
你竟然问我是什么细胞！你来这个板块都不知道是什么细胞吗？8 t7 y  Y" }$ x. `  c
我都贴了40倍的照片，已经最大了。- p7 A2 M. M8 |3 g% U
包装病毒都48小时了，期间没有换液，有细胞碎片是很正常的。
% A, S3 t6 ^- @! d, g你要看正常的，看其他帖子，你再去看看脏不脏？
) T; n6 v1 c9 |4 J) M提问题前请自己先看看清楚

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27# maz_2008
" B( L: l1 Y! {6 p" T; a# t; p5 X慢病毒载体是质粒。。。% d- `" `, i9 U0 T8 Z( E: m2 ~
质粒用TE或水溶，直接放-20℃就行了

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回复 57# mmssyyee - s% a8 ?, ^( n$ V( z# B  S* o
看载体！不同的载体不同，用lipo2000的话，一般80%应该没问题