特定启动子+GFP构建报告基因 - 实验室综合讨论区干细胞之家

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楼主

发表于 2013-3-13 20:58 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印

想把特定的启动子与GFP连接进去病毒表达载体构成报告基因，病毒转染细胞后，观察细胞分化过程中的基因表达窗。想请教下一般用什么质粒载体？如果要筛选稳定细胞株是不是还需要加上筛选基因，还是GFP就够了？启动子一般是UCSC中查找-2000bp至+100bp吗？提取DNA对特定启动子PCR容易吗？谢谢！

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沙发

发表于 2013-3-15 10:02 |显示全部帖子

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谢谢建议！再请问下一般用什么载体构建比较好呢？

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藤椅

发表于 2013-3-15 13:25 |显示全部帖子

回复 pingzongyunlan 的帖子( g ]8 z0 E9 r- t9 M. }! B U7 S
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谢谢，但是pEGFP-C1这一系列的质粒只能用于瞬转吧，转染human ESC很困难吧？

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