关于脐带间充质培养的问题

hwlightning

最近处理了一份15cm长脐带，剔除羊膜、静动脉后，用眼科剪剪成很小很小一块，用组织块贴壁法做了10皿，培养箱倒置了2个小时后，加入3ml培养液。期间一直没管，第三天观察，组织块变得很肿大，而且有的已经飘起来了，不管了，添加5ml培养液，再过3天，组织块飘了一大半，也没看见细胞爬出来。又过了3天，把飘起来的组织和培养液都去掉，重新加入10ml培养液，到现在12天了，都还没看见细胞爬出来，各位帮我看看是哪里出了问题了？？？？) v1 Q# t) g! M
我分析了下，一个是组织块没有贴壁贴牢，二是培养液的更换时间问题。
7 m6 b9 s1 v* ?! d! u) {给位同仁帮我看看到底是什么问题？

hwlightning

回复 20084720113 的帖子* ?# y$ a+ n. t% c5 t
1 `( w: D/ D8 H4 v
不加任何东西就24H静置？我是用的9cm的皿，应为是做临床我是用的商品化的培养基。

hwlightning

回复 小小龙001 的帖子
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我制备完我都不会动，三天后才会拿出来看看。可就是贴不住

hwlightning

回复 deshenglll 的帖子! Q! z$ k5 `: N( ~9 [; A
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你们一根15cm脐带可以做几个90cm培养皿（或者t75培养瓶）？做开始的培养基加几毫升？

hwlightning

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大少，那个接种到T75培养瓶怎么做才能摆好，剪好的组织匀浆很难分成一块一块,还有不好粘液和气泡。
0 C8 S1 @8 j) l) [. Z3 K. a8 B6 R7 }: d还有个问题，不是所有组织块都能爬出细胞，有的组织块爬的快，有的慢，这样就只能根据爬的快的去传代培养吧！！！