HUMSCs培养过程出现的3种细胞团现象请教（附图）

wuxiao101325

9 I0 C7 }4 _: v/ g: W

/ a0 X1 _. _- V$ f% {一、连续传代培养至第8代出现：传代时铺板密度约为5000个/cm2，传至第8代时出现肉眼可见、分布均匀的细胞团，镜下观察如下图（放大100×），细胞团透亮，周围细胞小且圆鼓，继续传代仍有类似细胞团出现。  z( T: f& P8 A# e) I

" T4 y$ s3 b6 c5 r二、高密度持续培养出现：细胞铺满瓶底后，持续培养3d左右出现肉眼可见、培养器皿边缘较多的细胞团，镜下观察入下图（放大100×），细胞团中间的透光性差，周围的细胞扁平且边界模糊，随着培养时间的延续，细胞团逐渐增加，继续传代无此细胞团出现。  E5 B/ O: ~$ e

* n- ^8 \1 p2 |/ U& \3 z三、较高铺板密度培养出现：细胞铺满板密度为1-4×104个/cm2，培养至第3代时，培养3d左右出现肉眼可见、培养器皿边缘较多的细胞团，镜下观察入下图（放大40×），细胞团可透光，随着培养时间的延续，细胞团逐渐增加，且细胞团中样逐渐不可透光，继续传2代后无此细胞团出现。该细胞团茜素红染色和碱性磷酸酶染色为阴性或弱阳性。' ~  x$ p) t% x+ i- a! v% M

! \; d  q8 u) o8 R3 d请教这是什么现象？什么原因导致？

wuxiao101325

谢谢海洋同学和各位胞友的支持，我终于升级了

wuxiao101325

开始我也怀疑是铺板不均所致，但是有几回我看到出现这种团状的地区在整个培养瓶（75cm2）底部都均匀分布（肉眼可见），所以排除了这一可能

wuxiao101325

那很可能是细胞增殖过快！
* l( q% O( |9 q- j+ u$ lambassador 发表于 2010-5-28 20:38

4 s8 f1 f8 F! J  P7 K8 K, q* i
不排除这个可能，有文献介绍humsc有自发成骨的现象，不知这个是不是

wuxiao101325

回复 5# Iris
1 M) l/ d1 ^! g# q0 R( b, hHUCMSC

wuxiao101325

在这里--->
/ G* t4 y: J" D" g) G# {% }oldmac7 发表于 2010-5-28 21:54

+ z( w' [, [9 |7 [8 e谢谢分享

wuxiao101325

回复 11# zsc78
8 a! f* z8 M- ~8 j1 w6 m& s* d' h是消化成单个细胞悬液再接种的，也观察过，没有没消化散的情况，一般接种三天后才出现聚团现象

wuxiao101325

回复 12# xbs530515 ) E& [0 _# ]( l' r% ~! i5 L8 Q
培养条件都没变，血清也是同批次的

wuxiao101325

回复 14# kqyy 1 `/ K2 P* z4 b) {& D; s
我基本上是按以下操作进行的：
* Y* s; `$ f( w" ]http://www.stemcell8.cn/thread-18220-1-1.html

wuxiao101325

回复 9# ambassador - d/ d0 H( i$ `5 f
这篇文献才是自发成骨的，见discussion 高亮部分