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标题: 实验室污染原因找到了，请大家帮忙分析一下 [打印本页]

作者: zhouweixing000 时间: 2013-5-2 15:22 标题: 实验室污染原因找到了，请大家帮忙分析一下

培养干细胞的MEM是自己配的，胎牛是买的，每次复苏好细胞后拿去检测结果都是好的，但是将平皿放到培养箱里培养两三天再拿去检测结果内毒素是阴性，但是细菌真菌却都是阳性了！这种情况有没有可能是原来的培养基就已经污染了，但是还没有达到检测的限值，放入培养箱里培养两天细菌真菌繁殖到可以检测出来的程度了呢!

作者: yinfuhua 时间: 2013-5-2 17:10

如果是可疑真菌污染，建议用平皿放培养箱培养七天。因为根据真菌特性，培养时间短真菌是生长不出来的。最好用真菌专用培养基，培养箱调至22摄氏度，阳性率会更高。

作者: happyab 时间: 2013-5-3 12:10

个人感觉其实不用分析，call 人来到搞卫生，换掉hepa 外加紫外消毒一夜！问题解决！我以前的实验室就是这样干的！

作者: iytbxxg 时间: 2013-5-3 13:53

还是找到污染根源吧，相对楼上所说的，要是培养基污染了就call 人来到搞卫生可以吗，只有找到根源并处理好才不会有后顾之忧

作者: zsg 时间: 2013-5-3 16:29

细胞培养箱消毒，超净台消毒，操作时的口罩手套，操作过程规范（配培养基及超净台操作）0 k3 B* o3 C9 a6 L8 e& J
将培养基，培养基+血清，培养基+血清+细胞，共同培养，分析原因。
个人经验，一个是细胞已经污染，二是操作不注意，前者也是操作不规范引起的，污染和细胞一起冻存了。

作者: zsg 时间: 2013-5-3 16:30

如果条件允许，培养基还是买现成的液体，比较放心，自己配培养基的年代基本过去了。

作者: iytbxxg 时间: 2013-5-6 11:19

一般来说发生污染的话是从人，机，环，法和物来分析原因，我们实验室是这样要求的，要求你从整个实验过程考虑操作人（主要是操作无菌），仪器，环境，实验方法和物料是否有可能造成污染，你从这几方面考虑并作处理应该可以根除这次污染吧

作者: CoolCell 时间: 2013-5-10 19:32

培养箱也应是重点检查对象，应彻底清洗灭菌，如果有残留菌丝，很容易反复污染。当然首先应当排除培养基和细胞污染。

作者: 三月桂花香 时间: 2013-5-13 09:31

有可能培养基本身就污染了，可以空白放入培养箱然后再做鉴定，另外培养箱内是否污染，或者在加样过程中无菌操作不到位？

作者: yangcy-smile 时间: 2013-5-14 16:10

我们实验室在培养细胞时也出现过类似状况，一盘细胞开始几天都是好好的，即使这几天你都不动，后来就会出现细菌或者酵母之类的污染，做空白对照也没事，那就是培养箱的问题。

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