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标题: 脐带间充质细胞对盐水和pbs [打印本页]

作者: Tim 时间: 2012-7-20 15:42 标题: 脐带间充质细胞对盐水和pbs

盐水和pbs的相同点和不同点！对细胞的各种负面影响！
抛砖迎玉一下::::之前我做过实验！结果飘忽不定！！今看到论坛说:细胞在4度盐水6h存活率为90％。。。个人感觉有点意见

作者: quge_00 时间: 2012-7-20 16:05

没试过。。。! }9 |& L0 u v, T" T' }
但是，生理盐水和pbs的渗透压应该是接近的，, I7 X0 C0 W( E2 r4 v
但pH就不一样了，pbs是7.2-7.4,生理盐水是7;+ O# O1 [0 z7 k
两者都没有能量物质，是不是要上流式吗？？

作者: wangzhiqi86 时间: 2012-7-20 16:06

没有很大区别吧，我之前传细胞时就用过0.9%NaCl来替代PBS洗涤细胞。8 p, j$ y4 e' T2 ~6 T) c0 F4 _) d+ ^
生理盐水和PBS都是等渗作用，如果只是暂时处理细胞，没有多大区别，毕竟PBS也只是多了几个离子而已，细胞还不至于脆弱到这种程度吧。
当然，非要考察它们对细胞活性的影响，倒是有文献专门研究过，具体名字我忘了，大概是会有个10%的降低，但没有什么EDTA、柠檬酸钠这些的影响大。

作者: Tim 时间: 2012-7-20 16:24

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为何离心得时候细胞遇到盐水会有肉眼看到的白色絮妆物

作者: wangzhiqi86 时间: 2012-7-20 18:05

回复 Tim 的帖子! H! K% E. X5 B4 V: V. R

不明白你的意思？是把细胞重悬在0.9%NaCl，然后离心？我也用生理盐水洗涤过细胞，但没有出现这种情况。你是否有照片。

作者: Tim 时间: 2012-7-20 20:18

回复 wangzhiqi86 的帖子/ f, V$ v7 y9 ]! \( q# q3 K
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照片拍出来不效果几乎看不出来！改天我多弄点细胞加到盐水袋里来张显

作者: leostar131 时间: 2012-7-20 22:40

回复 Tim 的帖子
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我用盐水和PBS试过，在盐水中大概十分钟就会出现白色絮状物，而PBS时间会晚一点出现，这些白色絮状物是由于间充质干细胞高表达粘附分子，所以细胞成团，且有的细胞膜已破裂，DNA被释放出来，缠绕在细胞团块周围

作者: Tim 时间: 2012-7-21 08:29

本帖最后由 Tim 于 2012-7-21 08:34 编辑 0 f4 m+ H8 x' J) `/ H  a0 t+ M
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回复 leostar131 的帖子" E( D1 q1 K, c, J6 r+ C

十分钟？？？？？我做的实验结果不是10min！！时间不确定5~30不等                盐水里为何出现这种反应？这是我遇到的谜，，我看到论坛里有人提到过有这类的文献！但是我着不着

作者: jiefengbing 时间: 2012-7-21 09:43

回复 leostar131 的帖子4 s/ \4 h2 i$ K3 c

高黏附因子，请问是e-cadherin吗？在白色絮状物你指的是正常的沉淀还是白膜？细胞正常静止是会有沉淀的，要是白色絮状东西可能是细胞消化过度了。

作者: lazyworm 时间: 2012-7-21 10:33

如果只是洗涤细胞应该没什么大的区别吧，我觉得出现白色絮状物是因为细胞分泌了一些蛋白的缘故，尤其是在细胞比较密集时会出现这样的现象，细胞不容易吹散。

作者: Tim 时间: 2012-7-21 11:02

回复 jiefengbing 的帖子
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消化过度不可能！做过多次实验！排除消化过度的原因！我俩不是指正常的沉淀！是白膜！

作者: leostar131 时间: 2012-7-23 23:30

回复 jiefengbing 的帖子0 G7 P* z* ?5 P
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高表达内皮细胞标志物的CD分子，白色絮状物是白膜，消化不过度，如果时间长了也会出现，不信你试试

作者: leostar131 时间: 2012-7-23 23:31

回复 Tim 的帖子7 s% _6 r+ c( T
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也是大概10分钟左右，当然每次也没那么准，确实是5~30min不等，具体什么原因也没找到，看哪位高人能指点一下

作者: jxaf3900824 时间: 2012-7-24 10:02

消化过度有可能.但加点白蛋白就高定了.

作者: Tim 时间: 2012-8-8 16:42

回复 leostar131 的帖子! |, o8 u: M T7 h# r* x
1 a: c* _) z. m* e* v0 S. u9 K( ~, Q
机理？？？为何破裂！

作者: Tim 时间: 2012-8-8 16:46

回复 jxaf3900824 的帖子

机理是什么？

作者: wcforever126 时间: 2012-8-8 17:06

回复 Tim 的帖子/ D5 ^# a! t& r3 I" |+ z
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您的帖子是指分离间充质干细胞这个过程吗？离心时候用生理盐水悬浮影响真有那么大吗？

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