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标题: 哪位大虾帮我分析一下我的细胞是怎么回事呢？ [打印本页]

作者: jss667795 时间: 2011-6-2 09:02 标题: 哪位大虾帮我分析一下我的细胞是怎么回事呢？

我养大鼠骨髓间充质干细胞，用的直接贴壁培养的，长到第6天还好好地，第7天就出现很多像树杈一样的分支，我在第7天照常传代，用的胰酶加0.01%的EDTA，但是弄了半个小时，细胞还是没反应。用习惯吹打，细胞也不脱落。养了几批细胞了，最近这两批一直这样，我想知道是什么原因导致间充质干细胞变成这样的情况呢？我还培养时还要注意什么呢？养了3个月了，一点成效也没有。我是新手，真的很疑惑。

作者: 细胞海洋 时间: 2011-6-2 09:06

建议上图

作者: luoziwei 时间: 2011-6-2 09:18

细胞可能老化了吧

作者: 皮搋子 时间: 2011-6-2 09:33

注意血清水平，试着把血清降低1%、2%，如果有可能，换血清使用。; t, j3 Y' J9 i7 h) v

培养瓶的问题也是会导致此类事情发生，换个品牌试试。目前又卖假的康宁的瓶子，害死人啊。

作者: hygene 时间: 2011-6-2 11:03

上pp,可能是老化或者分化了。

作者: lidaifu001 时间: 2011-6-2 11:04

这种情况就是细胞老化的表现，之所以出现，考虑是细胞的营养供应不足所致，可以适当的增加换液次数来避免

作者: gact 时间: 2011-6-2 11:17

血清低点比较好的么？9 c' M( {$ l" ?7 t

作者: 皮搋子 时间: 2011-6-2 11:45

血清水平越高，分化速度越快，老化速度也较快

作者: subenjinwo 时间: 2011-6-2 11:57

我也觉得是分化了哦。

作者: 大少爷 时间: 2011-6-2 12:22

1.使用无血清培养基。2.使用比较好的培养瓶，我们用nunc的，很好用。3.可以提前消化传代，用胰酶即可，不加EDTA，几分钟可以消化好，吹打也行。4.培养过程中可以增加换液次数，但要注意保证无菌操作。5.可以新换一批大鼠骨髓间充质干细胞，重新培养，注意温度，CO2浓度。6.多在倒置显微镜下观察生长状况。

作者: jss667795 时间: 2011-6-5 15:15

回复 lidaifu001 的帖子, c7 H/ p5 L# O. ^+ f
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谢谢了~~还想请教一下，LIF 和bFG有什么区别呢？我的细胞老化这么快也有同学说是分化了我加哪种会避免这样的事情发生呢？

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