本身带有荧光的细胞如何进行流式细胞检测

aulenuyah

本人构建了一些细胞，分别表达绿色荧光和红色荧光，今天做流式（细胞周期和FITC/Annixin V）的时候，发现对结果会有很大的干扰。
, U2 I, y$ G0 D9 W, f) R请问，是否有其他的一些试剂盒可以解决这个问题？' v2 ^0 q8 \6 x+ n2 }' s& R; ^
我们使用的是BD的盒子。2 D; j: M" [9 F3 t! z, k% D) l0 [/ T
谢谢~~

LiuRoc

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0 |- w$ ~- V' o: i9 o" FGFP与FITC是同一个通道，肯定不能同时用，将FITC换掉；至于红光，不知其光谱多少、宽窄、走哪个通道？查下然后避开补偿大的荧光抗体应该就可以了。

app_1983

如果你要检测表达绿色荧光蛋白的细胞的话，测凋亡可尝试用7-AAD/Annixin-V试剂盒，这样就可以避开使用与GFP相同的通道；如果是红色荧光蛋白的细胞，就可以使用你之前所说的FITC/Annixin-V试剂盒了，应该没问题的，预祝你实验顺利!

zz091115

GFP走的是FITC RFP是PE或是mecherry通道 细胞周期可以用DAPI 但是PI就不行了 凋亡的7-AAD/Annixin-V就不行了 去找找别的颜色或是单独的Annixin-V 然后自己加荧光二抗 ebioscience有405激光下的 可以去选选 另外做这个实验用BD 的盒子很奢侈啊 国产的信号就足够好了

aulenuyah

回复 zz091115 的帖子6 [% p! y; ]7 n+ ?4 Y# o
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谢谢哦~~我们正在尝试重新构建不带荧光的质粒